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Reattivo di Lugol - Preparare il reattivo di Lugol

biologia


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TITOLO: Reattivo di Lugol.

OBIETTIVO: Preparare il reattivo di Lugol.

PRINCIPIO BIOLOGICO:

Colorazioni semplici dei microrganismi.

Realizzando una colorazione semplice si ottiene una descrizione pi dettagliata della morfologia della cellula. I microrganismi in condizioni vitali impediscono il passaggio dei coloranti per questo motivo le cellule, prima del processo di colorazione, vengono trattate con il calore per ucciderle.

I coloranti sono composti organici costituiti da un gruppo cromoforo, caratterizzando il colore specifico e un gruppo auxoromo responsabile del legame con il preparato.

Per i batteri si utilizzano i colori all'anilina e si distinguono in acidi e basici, i i usati sono quelli basici, ad esempio blu di metilene, violetto di genziana, fuxina basica.

Tra i coloranti acidi, ricordiamo la fuxina acida e la microsina.

La preparazione delle soluzioni coloranti si compone di due fasi:

  1. costituzione di una soluzione macroalcolica (10 mg coloranti a 100 mi di alcol etilico);
  2. preparazione di soluzioni idrolacoliche (10 mg di soluzione madre e 90 ml di acqua distillata).

Nel caso si desideri aumentare l'effetto della colorazione si utilizza un mordenzante, sostanza capace di fornire l'ingresso del colorante con gli elementi strutturali della cellula. Vengono utilizzati i seguenti mordenzanti:

    • acido fenico;
    • soluzione iodurata (Lugol);
    • tammino.

Il reattivo di Lugol si prepara con 1 gr di iodio, 1 gr di ioduro di potassio e 100 ml di acqua distillata.




MATERIALE UTILIZZATO:

    • ioduro di potassio;
    • iodio;
    • spruzzetta contenente acqua distillata;
    • becher da 100 ml;
    • 2 vetrini ad orologio;
    • crogiolo;
    • pestello;
    • bacchetta;
    • bilancia.

PROCEDIMENTO:

    • per prima cosa, sono stati presi 2 vetrini ad orologio;
    • con l'uso della bilancia sono stati pesati 1,124 gr di iodio e 1,150 gr di ioduro di potassio prelevati dai rispettivi contenitori;
    • i grammi di iodio sono stati inseriti nel crogiolo con qualche goccia di acqua distillata, contenuta nella spruzzetta, e fatti sciogliere mediante l'uso del pestello.
    • i grammi di iodio sono stati versati all'interno di un becher da 100 ml e con l'uso della bacchetta sono stai mescolati e pestati aggiungendo acqua distillata, naturalmente poco per volta.
    • i grammi di ioduro di potassio sono stati inseriti anch'essi nel crogiolo, sempre con qualche goccia di acqua distillata, e versati in seguito insieme ai grammi di iodio continuando a pestare e mescolare, sempre con l'uso della bacchetta, la miscela ottenuta con acqua distillata fino ad arrivare al limite segnato dal becher.
    • Successivamente la miscela ottenuta stata poi versata all'interno di una bottiglietta.

CONCLUSIONI:

Si avuto modo di preparare un colorante, in questo caso il Lugol, utilizzato per prendere in esame le pareti cellulari dei microrganismi presi in esame.

OSSERVAZIONI:

Il colore del reattivo di Lugol stato scuro, per cui si pu dire che l'esperienza riuscita.








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