Reattivo di Lugol - Preparare il reattivo di Lugol

biologia

TITOLO: Reattivo di Lugol.

OBIETTIVO: Preparare il reattivo di Lugol.

PRINCIPIO BIOLOGICO:

Colorazioni semplici dei microrganismi.

Realizzando una colorazione semplice si ottiene una descrizione più dettagliata della morfologia della cellula. I microrganismi in condizioni vitali impediscono il passaggio dei coloranti per questo motivo le cellule, prima del processo di colorazione, vengono trattate con il calore per ucciderle.

I coloranti sono composti organici costituiti da un gruppo cromoforo, caratterizzando il colore specifico e un gruppo auxoromo responsabile del legame con il preparato.

Per i batteri si utilizzano i colori all'anilina e si distinguono in acidi e basici, i iù usati sono quelli basici, ad esempio blu di metilene, violetto di genziana, fuxina basica.

Tra i coloranti acidi, ricordiamo la fuxina acida e la microsina.

La preparazione delle soluzioni coloranti si compone di due fasi:

1. costituzione di una soluzione macroalcolica (10 mg coloranti a 100 mi di alcol etilico);
2. preparazione di soluzioni idrolacoliche (10 mg di soluzione madre e 90 ml di acqua distillata).

Nel caso si desideri aumentare l'effetto della colorazione si utilizza un mordenzante, sostanza capace di fornire l'ingresso del colorante con gli elementi strutturali della cellula. Vengono utilizzati i seguenti mordenzanti:

• acido fenico;
• soluzione iodurata (Lugol);
• tammino.

Il reattivo di Lugol si prepara con 1 gr di iodio, 1 gr di ioduro di potassio e 100 ml di acqua distillata.

MATERIALE UTILIZZATO:

• ioduro di potassio;
• iodio;
• spruzzetta contenente acqua distillata;
• becher da 100 ml;
• 2 vetrini ad orologio;
• crogiolo;
• pestello;
• bacchetta;
• bilancia.

PROCEDIMENTO:

• per prima cosa, sono stati presi 2 vetrini ad orologio;
• con l'uso della bilancia sono stati pesati 1,124 gr di iodio e 1,150 gr di ioduro di potassio prelevati dai rispettivi contenitori;
• i grammi di iodio sono stati inseriti nel crogiolo con qualche goccia di acqua distillata, contenuta nella spruzzetta, e fatti sciogliere mediante l'uso del pestello.
• i grammi di iodio sono stati versati all'interno di un becher da 100 ml e con l'uso della bacchetta sono stai mescolati e pestati aggiungendo acqua distillata, naturalmente poco per volta.
• i grammi di ioduro di potassio sono stati inseriti anch'essi nel crogiolo, sempre con qualche goccia di acqua distillata, e versati in seguito insieme ai grammi di iodio continuando a pestare e mescolare, sempre con l'uso della bacchetta, la miscela ottenuta con acqua distillata fino ad arrivare al limite segnato dal becher.
• Successivamente la miscela ottenuta è stata poi versata all'interno di una bottiglietta.

CONCLUSIONI:

Si è avuto modo di preparare un colorante, in questo caso il Lugol, utilizzato per prendere in esame le pareti cellulari dei microrganismi presi in esame.

OSSERVAZIONI:

Il colore del reattivo di Lugol è stato scuro, per cui si può dire che l'esperienza è riuscita.